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Cell viability (세포 생존율) 측정 방법 - MTT assay 실험 방법으로 확인 해 봅시다. [내부링크]

MTT assay 의 원리 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 는 정상적으로 살아있는 혹은 증식하는 세포(대사과정이 온전한 세포)에서는 미토콘드리아의 탈수소 효소작용에 의해 수용성의 노란색 MTT 를 비수용성의 MTT formazan (자주색)으로 환원시키게 됩니다. 비수용성인 MTT foramazan을 DMSO 또는 DMF 에 용해시켜 흡광도를 측정할때 파장은 540 nm이며, 측정된 흡광도가 높을 수록 살아있고 대사적으로 왕성한 세포임을 나타냅니다. 장점 : 1) sensitive, 2) accurate, 3) safety, 4) easy & rapid, 5) semiautomatic 등이 있습니다. ※ 1. MTT ..

둘째 아들의 밀키트 추천 간단 요리 5 – “김준호의 대단한갈비-고기듬뿍돼지짜글이" 도전! [내부링크]

안녕하세요... 중학교 1학년인 둘째 아들이 ‘밀키트’ 음식을 직접 집에서 조리해서 먹더니,, 계속 밀키트 음식만 야식으로 먹고 있습니다. “집밥뚝딱” 밀키트는 종류가 많아서 선택의 폭이 나름 많았는데, 우리 동네 “집밥뚝딱” 매장이 리뉴얼~ 중이라서 한동안 이용하지 못할 것 같아 서운해 하는 아들녀석이 찾아낸,, 다른 밀키트 업체 “김준호의 대단한 갈비” 에서 “고기듬뿍 돼지짜글이” 를 조리해 보았습니다. (물론, 둘째 아들이 했습니다.) 맞습니다.. 우리가 다~ 아는 개그맨 김준호 그 "김준호" 맞습니다. (저도 처음에는 누군지 자기 이름 걸고 참! 당당하다.. 라고 생각했었습니다. ㅋㅋㅋ) 이곳은 메뉴가 대부분 고기 위주라서, 딱~히 야식으로 먹을 만한 메뉴가 없네요.. 앞으로 몇번을 더 이용할지 ..

ICC staining 실험 중 가장 어려운 "부착 세포의 표면 단백질 형광 염색" 방법입니다. [내부링크]

ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 방법은 다음과 같은 3가지 방법으로 수행합니다. 대부분의 실험은 "부착세포에서 세포내 / 핵 단백질을 염색하는 방법 " 입니다 (링크 참조). 그리고, 현탁액에서 고정되지 않은 세포에 표면 단백질 염색방법 (FACS 적용가능) 으로 링크를 클릭하시면 확인하실 수 있습니다. 마지막은 지금 설명드릴 “부착 세포의 표면 단백질의 형광 염색” 방법입니다. 간단하게 소개하고, 세부적인 설명을 추가해서 요약하도록 하겠습니다. 일반적으로 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining)을 수행하는 목적은 세가지 입니다. 첫번째는 타겟 단백질의 세포내 위치 확인하기 위해서, 두번째는 발현시킨 외부유전자의 발현을 확인하기 위해서, 마지..

쉽게 할 수 있는 ICC staining 실험 - 세포 표면 단백질 염색 방법 [내부링크]

일반적으로 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining)을 수행하는 목적은 세가지 입니다. 첫번째는 타겟 단백질의 세포내 위치 확인하기 위해서, 두번째는 발현시킨 외부유전자의 발현을 확인하기 위해서, 마지막으로 세번째는 2가지 이상의 단백질의 상호간 관련성 (interaction)을 확인 및 검증하는 것입니다. 물론, 한꺼번에 모두 확인할 수도 있습니다. 세포 배양 / 성장 형태, 즉 부유 / 부착 (suspension / adhesion) 세포에 따라, 그리고 타겟 단백질의 발현 위치(세포내)에 따라 적용되는 실험 방법이 조금씩 다릅니다. 이번에는 “현탁액에서 고정되지 않은 세포에 표면 단백질 염색방법” (FACS 적용가능)을 설명합니다. 현탁액에 고정되지 않은 세포 표면 단백질 ..

중국 드라마 정주행 추천 7탄! - 조로사(赵露思, 자오루시) 출연 최신 중국 판타지 무협 로맨스 드라마 3편을 소개합니다. [내부링크]

넷플릭스, 왓챠 같은 기존의 OTT 서비스 외에 티빙(TVING), 웨이브(WAVVE), 시리즈온, 쿠팡플레이 등, 특히 중국드라마를 많이 링크하고 있습니다. 이번에도 조로사 (赵露思, 자오루시) 주연, 조연의 최신 중국 판타지 무협 로맨스 드라마 3편을 간단하게 소개합니다. 중국 드라마는 수년 동안 특히 판타지 무협 로맨스 장르에서 점점 더 인기를 얻고 있습니다. 이 장르에서 떠오르는 스타 중 한 명은 매력적인 연기와 매력적인 캐릭터로 유명한 조로사 (赵露思, 자오루시)입니다. 놓치고 싶지 않은 자오루시 주연의 최신 중국 판타지 무협 로맨스 드라마 3편을 소개해드릴게요! 1. " 장가행(长歌行) , The Long Ballad" (2021) - 중국 텐센트TV에서 2021.03.31. ~ 2021.05..

초보 연구자들도 쉽게 할 수 있는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법 - 요약 및 정리 [내부링크]

오늘은 in vitro 실험에서 빠질 수 없는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법을 소개하고 설명 및 요약하도록 하겠습니다. 실험 목적은 아래와 같습니다. 1. 일반적으로 타겟 단백질이 세포내 어느 위치에 존재하는지 확인 2. 외부 유전자를 발현시킨 단백질에 제대로 발현하는지 확인 3. 단백질 상호간의 관련성 (interaction) 을 확인 4. 1,2,3 번 모두를 동시에 확인 및 검증 실험방법은 아래 세가지 조건에 따라 조금씩 다릅니다. 참고하시기 바랍니다. 1. 세포 배양/성장 형태, 즉 부유 / 부착 (suspension / adhesion) 세포에 따라 적용되는 방법 2. 대상 단백질의 세포내 (혹은 예상되는) 위치가 세포질 / 핵 / 세포막 (cyt..

정주행 중국드라마 추천 6탄 - “조로사” 주연 타임슬립 중드 '전문중적진천천 (传闻中的陈芊芊, The Romance of Tiger and Rose)' 강추~강추~!! ^^ [내부링크]

정주행 추천 중국드라마 6탄입니다. 메니아층에서 많은 사랑을 받고 있는 조로사 (짜오루스, 赵露思, Zhao Lusi)의 중국드라마 작품들 중에서 판타지 로맨스, 무협, 고장극 위주로 소개를 하고 있어요. 개인적으로 현대물 위주의 중국 드라마는 별로 땡기지 않아서.. ㅋㅋㅋ 이번에는 여주인공 (조로사) 이 다양한 방법으로 타임슬립되어 과거에서 이야기가 전개되는 3편의 판타지 로맨틱 고장극 중국 드라마 중 탄탄한 연기력으로 이뿜, 귀여움의 시너지를 불러 일으킨 여주인공 "조로사"를 만날 수 있는 [전문중적진천천(传闻中的陈芊芊, The Romance of Tiger and Rose)]을 소개합니다. 주말을 이용해서 정주행 할 수 있을 정도로 짧은 내용입니다. 이번 주말은 조로사의 매력에 풍덩~ 빠질 수 있을..

정주행 중국드라마 추천 5탄 - “조로사” 주연 타임슬립 중드 '춘화추월: 천생의 연인(天雷一部之春花秋月, Love better than Immortality) ' 강추~^^ [내부링크]

정주행 추천 중국드라마 5탄입니다. 메니아층에서 많은 사랑을 받고 있는 조로사 (짜오루스, 赵露思, Zhao Lusi)의 중국드라마 작품들 중에서 판타지 로맨스, 무협, 고장극 위주로 소개를 하고 있어요. 개인적으로 현대물 위주의 중국 드라마는 별로 땡기지 않아서.. ㅋㅋㅋ 이번에는 여주인공 (조로사) 이 다양한 방법으로 타임슬립되어 과거에서 이야기가 전개되는 3편의 판타지 로맨틱 고장극 중국 드라마 중 이쁨과 귀여움으로 승부한 여주인공 "조로사"를 만날 수 있는 [춘하추월:천생의 연인 (天雷一部之春花秋月, Love better than Immortality)]을 소개합니다.. 주말을 이용해서 정주행 할 수 있을 정도로 짧지 않지만, 저와 함께 조로사의 매력에 풍덩~ 빠져 보아요! ^^ 자 그럼 지금부터..

정주행 중국드라마 추천 4탄 - “조로사” 주연 타임슬립 중드 '오! 나의 황제폐하 (哦! 我的皇帝陛下)' 강력 추천해요~ [내부링크]

정주행 추천 중국드라마 4탄입니다. 메니아층에서 많은 사랑을 받고 있는 "조로사 (짜오루스, 赵露思, Zhao Lusi)" 의 중국드라마 작품들 중에서 판타지 로맨스, 무협, 고장극 위주로 소개를 하고 있어요. 개인적으로 현대물 위주의 중국 드라마는 별로 땡기지 않아서.. ㅋㅋㅋ 이번에는 여주인공 (조로사) 이 다양한 방법으로 타임슬립되어 과거에서 이야기가 전개되는 3편의 판타지 로맨틱 고장극 중국 드라마 중 귀엽고 깜찍한 로맨틱 코미디 여주인공 "조로사"를 만날 수 있는 [오! 나의 황제폐하(哦! 我的皇帝陛下)] 를 추천합니다. 조금 유치찬란한 병맛일 수도 있지만,,,저와 함께 조로사의 매력에 풍덩~ 빠져 보아요! ^^ 자 그럼 지금부터 시작할게요! 먼저, 간단한 조로사 소개 본명 : 조로사 (赵露思Z..

정주행 중국드라마 추천 3탄 - “조로사” 조연 '봉수황(凤囚凰, Untouchable Lovers)' 강력 추천 합니다. [내부링크]

정주행 추천 중국드라마 3탄입니다. 최근에 OTT 서비스가 많아졌습니다. 넷플릭스, 왓챠 같은 기존의 OTT 서비스 외에 티빙(TVING), 웨이브(WAVVE), 시리즈온, 쿠팡플레이등 이 있습니다. 추가로 미국 영화/드라마 위주의 디즈니+ 도 있습니다. 오늘은 중드 메니아층에서 많은 사랑을 받고 있는 조로사 (짜오루스, 赵露思, Zhao Lusi)의 중국드라마 작품들 중에서 판타지 로맨스, 무협, 고장극을 하나씩 소개해 드리려고 해요. 개인적으로 현대물 위주의 중국 드라마는 별로 땡기지 않아서.. ㅋㅋㅋ 주말을 이용해서 정주행 할 수 있는 짧은 드라마도 있지만, 오늘은 조금 긴~ (54편) '봉수황' 을 소개합니다. 저와 함께 조로사의 매력에 풍덩~ 빠져 보아요! ^^ (안타깝지만 17화 이후부터 나옵..

둘째 아들의 '집밥뚝딱' 밀키트 추천 간단 요리 4- "쭈꾸미 볶음" 도전! [내부링크]

안녕하세요... 중학교 1학년인 둘째 아들녀석이 요즘들어 부쩍~ 요리에 관심을 갖고 재료를 사서 이것저것 요리를 해보겠다고 나서는 바람에.... 아직, 과도도 사용해 본적이 없는 녀석이라,,, 고민하다가 일단,, 밀키트를 이용해서 다양한 요리가 있고 각각의 재료 및 조리 방법을 경험시키려 했습니다. 앞으로 몇개까지 흥미를 갖고 계속 할런지 모르겠지만,,, 기록에도 남기고,,, 소개도 할까 싶어 블로그에 올려봅니다. (내돈내산 입니다. 광고 아니에요~ ^^) 오늘은 4 탄 – 쭈꾸미 볶음 만들기 입니다. ^^ 역시,,, 현실은 조금 다른 것 같습니다만,,, 이번엔 앞의 3가지 보다 가장 비슷해 보이죠? 아들녀석이 조리한 결과입니다. (약 15분정도 소요 되었습니다) 이번에는.. 물조절 할 일도 없이.. 그..

둘째 아들의 '집밥뚝딱' 밀키트 추천 간단 요리 3 - "안동찜닭" 도전! [내부링크]

안녕하세요... 중학교 1학년인 둘째 아들녀석이 요즘들어 부쩍~ 요리에 관심을 갖고 재료를 사서 이것저것 요리를 해보겠다고 나서는 바람에.... 아직, 과도도 사용해 본적이 없는 녀석이라,,, 고민하다가 일단,, 밀키트를 이용해서 다양한 요리가 있고 각각의 재료 및 조리 방법을 경험시키려 했습니다. 앞으로 몇개까지 흥미를 갖고 계속 할런지 모르겠지만,,, 기록에도 남기고,,, 소개도 할까 싶어 블로그에 올려봅니다. (내돈내산 입니다. 광고 아니에요~ ^^) 오늘은 3탄 - 안동찜닭 만들기 입니다. ^^ 역시,,, 현실은 조금 다른 것 같습니다만,,, 그래도 비슷해 보이죠? 아들녀석이 조리한 결과입니다. (약 40분정도 소요 되었습니다) 이번에는.. 물 조절 실패!! 많이 졸여주는 시간이,,, 조리법보다는..

둘째 아들의 '집밥뚝딱' 밀키트 추천 간단 요리 2탄 - "춘천 닭갈비" 도전! [내부링크]

안녕하세요... 중학교 1학년인 둘째 아들녀석이 요즘들어 부쩍~ 요리에 관심을 갖고 재료를 사서 이것저것 요리를 해보겠다고 나서는 바람에.... 아직, 과도도 사용해 본적이 없는 녀석이라,,, 고민하다가 일단,, 밀키트를 이용해서 다양한 요리가 있고 각각의 재료 및 조리 방법을 경험시키려 했습니다. 앞으로 몇개까지 흥미를 갖고 계속 할런지 모르겠지만,,, 기록에도 남기고,,, 소개도 할까 싶어 블로그에 올려봅니다. (내돈내산 입니다. 광고 아니에요~ ^^) 오늘은 2탄 - 춘천 닭갈비 만들기 입니다. ^^ 아들녀석이 조리한 결과입니다. (약 25분정도 소요 되었습니다) 현실은 조금 다릅니다... 비슷해 보여야 하는데..음.. 조금 실망입니다. 라면 끓이는 거랑 다를꺼 없다! 라고 생각하시는 분들도 계시겠..

둘째 아들의 '집밥뚝딱' 밀키트 추천 간단 요리 1탄 - "즉석 떡볶이" 도전! [내부링크]

안녕하세요... 중학교 1학년인 둘째 아들녀석이 요즘들어 부쩍~ 요리에 관심을 갖고 재료를 사서 이것저것 요리를 해보겠다고 나서는 바람에.... 아직, 과도도 사용해 본적이 없는 녀석이라,,, 고민하다가 일단,, 밀키트를 이용해서 다양한 요리가 있고 각각의 재료 및 조리 방법을 경험시키려 했습니다. 앞으로 몇개까지 흥미를 갖고 계속 할런지 모르겠지만,,, 기록에도 남기고,,, 소개도 할까 싶어 블로그에 올려봅니다. (내돈내산 입니다. 광고 아니에요~ ^^) 오늘은 1탄 - 즉석 떡볶이 만들기 입니다. ^^ 아주 먹음직스럽고 야식으로 막~ 땡기는 사진인듯 ㅋㅋㅋ 역시,,, 현실은 조금 다른것 같습니다만,,, 그래도 비슷해 보이죠? 아들녀석이 조리한 결과입니다. (약~ 10분정도 소요 되었습니다) 라면 끓이..

"내돈내산" 홈트레이닝 남성용 피트니스 장비 추천 목록입니다. [내부링크]

안녕하세요~!! COVID-19 팬데믹으로 인해 많은 사람들이 집에 머물게 되면서 가정용 피트니스 장비에 대한 수요가 크게 증가했습니다. 강제적인 규제들이 지금은 대부분 없어지면서, Gym 에 갈 수 있습니다만,, 그래도 아직 불안하신 분들이나 집에서 하는 운동을 하는 분들에게 좋은 정보가 될 것 같습니다. 홈트레이닝을 하시는 남성 아마추어 운동 초보자들을 위한 저렴한 몇가지 운동기구를 소개합니다. (절대로 업체 광고비 받고 올리는 글이 아닙니다. ^^) 1. 러닝머신 러닝머신은 심혈관 건강을 개선하려는 남성에게 훌륭한 선택입니다. 집을 떠나지 않고도 고강도 운동을 할 수 있는 편리한 방법을 제공합니다. 콤팩트한 디자인과 조정 가능한 속도 및 경사 옵션을 제공하는 멜킨(MELKIN) 스포츠 런닝 머신을 ..

김용의 영웅문(3편)은 사조삼부곡(射雕三部曲) 3부작의 해적판이었어요~! ^^ [내부링크]

안녕하세요.. 이번에는 고전 무협소설 “김용의 사조삼부곡(射雕三部曲)” 3부작에 대해 소개해 드리겠습니다. 고전 무협소설의 대표작이자 많이 알고 있는 “김용의 영웅문(英雄門)” 시리즈는 1980년대에 판권계약없이 번역, 출판된 일종의 해적판 입니다. 원작은 앞서 말씀드린 것처럼 “사조삼부곡(射雕三部曲)” 3부작으로, 3편의 소설로 구성되어 있습니다. 1부 《사조영웅전》(1957), 2부 《신조협려》(1959), 3부 《의천도룡기》(1961) 가 각각 연결된 내용입니다. 이제부터 사조삼부곡(射雕三部曲) 1부, 2부, 3부를 각각 소개해드리겠습니다. (다들 많이 알고 있겠지만,,, ㅎㅎ) 1부 – 사조영웅전 (射雕英雄传, The Legend of the Condor Heroes) 고려원의 무단번역으로 영웅문..

정주행 중국 드라마 추천작 두번째 입니다. 강추합니다.^^ [내부링크]

지난번 정주행 추천 중국드라마 2탄입니다. 넷플릭스나 왓챠 같은 OTT 서비스 이용하시는 분들 많으시죠? 오늘은 중드 메니아층에서 많은 사랑을 받았고, 3~5년전에 제작된 작품들이지만, 대중적으로 많이 알려지지 않은 중국 드라마 작품들을 엄선해서 알려드리려고 해요. 자 그럼 지금부터 시작할게요! 청낭전 (靑囊传, Prodigy healer) 청낭전은 2019년 중국에서 제작된 판타지 로맨스 드라마입니다. 무천 역할을 맡은 리홍이 (李宏毅, Li Hongyi, 이굉의) 와 예윈창 역할을 맡은 조로사 (짜오루스, 赵露思, Zhao Lusi )가 주연을 맡았습니다. 드라마는 총 36편으로 제작되었습니다. 청낭전은 대를 이어 의술을 연구해 온 신목족 (神木族)소년 무싱천이 절벽에서 떨어진 병원 집안의 딸 예윈창..

왜 이렇게 날씬해 보이지? 내 몸매 맞아? 이거 실화야? (요가복, 필라테스복) [내부링크]

최근 들어 필라테스나 요가 같은 운동을 하는 사람들이 늘어나고 있는데요. (저는 주로 유산소, 근력운동을 주로 하지만,, 홈트레이닝 복으로도 좋을 것 같습니다.) 이는 체중 감량뿐만 아니라 체형 교정 효과까지 얻을 수 있기 때문이었어요. 따라서 많은 연예인들이나 셀럽들 사이에서도 인기 있는 운동 중 하나인데요. 이런 트렌드에 맞춰 요즘엔 예쁘고 기능성 높은 필라테스복과 요가복 브랜드 제품들이 많이 출시되고 있었어요. 그래서 오늘은 예쁜 디자인과 뛰어난 기능성을 자랑하는 몇 가지 아이템을 소개해 드리려고 해요. 오늘 소개해 드릴 첫 번째 상품은 '룰루레몬'이에요. 룰루레몬은 캐나다 프리미엄 스포츠웨어 브랜드로 이미 국내에서는 마니아층이 두터운 브랜드이기도 한데요. 미국 시장 점유율 1위를 차지했을 정도로 ..

스트레스 확 날려주는 신나는 댄스 운동 ́줌바댄스 ́ [내부링크]

요즘 야식과 군것질은 너무 많이 해서 뱃살이 장난 아닌데요 ㅠ 그래서 집에서 가볍게 시작할 수 있고 또 신나는 운동을 찾아보았는데요! 그래서 오늘 소개해드리고 싶은 운동은 바로 ‘줌바댄스’입니다. 먼저 '줌바댄스'는 1990년대 콜롬비아 안무가인 베토 페레즈가 개발한 피트니스 댄스로, 에어로빅처럼 정해진 순서대로 진행되는 것이 아니라 강사의 리드에 따라 자유롭게 움직이며 즐기는 것이 특징입니다! 남미 특유의 흥겨운 리듬에 맞춰 빠르고 반복적인 동작을 하기 때문에 쉽게 따라 할 수 있고, 재미있게 살을 뺄 수 있다는 점에서 젊은 여성들도 시작을 하고 있다고 합니다 ㅎㅎ 운동과 춤을 동시에 즐길 수 있는 줌바댄스는 1시간에 1000kcal 소모 효과가 있다고 하는데요. 최근 한 방송 프로그램에서 배우 최여진..

재밌는 미국 드라마도 보고, 실생활 회화도 배우고 ! 이게 바로 일석이조 ?! [내부링크]

안녕하세요 여러분~ 오늘은 제가 재미있는 영어 공부법을 하나 소개해드리려고 해요! 바로 미드로 배우는 영어공부인데요!! 영어권 국가인 미국이나 영국 등에서는 일상적인 대화 속에서도 자연스럽게 다양한 상황별 표현들을 사용하는데요. 우리나라 사람들은 시험용 영어에만 익숙해져서 이런 실제 생활에서의 영어표현들이 낯설게 느껴지는 경우가 많죠? 그래서 저는 미드를 통해 현지인들의 생생한 리얼 발음과 억양을 익히고 그 안에 담긴 유용한 관용구나 문법까지 한번에 학습할 수 있어서 정말 좋더라구요^^ 여러분께도 저의 최애 미드 추천드리고 싶은데요~~ 저처럼 평소에 미드 즐겨보시는 분들이라면 아마 이미 알고 계실 수도 있을 것 같아요 ᄒᄒ 제가 요즘 푹 빠져버린 넷플릭스 오리지널 시리즈 랍니다 !! 넷플릭스 오리지날 시..

당신도 드라마 폐인이 될 수 있다. 중국 드라마 추천 목록 공개! [내부링크]

요즘 코로나19 가 많이 풀렸다 하더라도 아직까지 조금씩 확진자가 나오니 걱정이 있기는 합니다. 그래서 이전보다는 집에 머무는 시간이 많아 넷플릭스나 왓챠 같은 OTT 서비스 이용하시는 분들 많으시죠? 저 역시 집콕 생활이 길어지면서 최근 몇 달 동안 미드와 중드 등 해외 드라마 시청하는 재미에 푹 빠져 살고 있답니다. 그래서 오늘은 여러분께 한국에서도 많은 사랑을 받고 있는 중국 드라마 작품들을 엄선해서 알려드리려고 해요. 자 그럼 지금부터 시작할게요! 오늘의 첫 번째 주인공은 바로 이랍니다. 이 드라마는 2019년 12월 18일 방영을 시작하여 2020년 3월 19일 종영된 총 43부작의 로맨스 드라마인데요. 겨우 서른이라는 제목처럼 이제 막 서른 살이 된 세 명의 여성들이 각자의 삶 속에서 겪게 되..

PBS buffer (pH 7.0~8.0) 쉽게 만들어 봅시다~^^ [내부링크]

Phosphate-buffered saline (PBS) - 사용하는 용도에 따라 D-PBS, PBS (-), PBS (+) 등의 종류가 다양하지만, 실험결과에 큰 영향을 주는 경우는 없음. - 사용상 [반드시 D-PBS 를 사용] 이라는 caution 이 없는 경우 구분없이 사용해도 무방하다. 1. 일반적인 PBS 제조 방법 (pH meter 로 보정) 1X PBS 8 g NaCl 0.2 g KCl 1.44 g Na2HPO4 0.24 g KH2PO4 in 800 ml of distilled H2O. Adjust the pH to 7.4 with HCl. (1N or 3N HCl 사용, 한방울씩 천천히 추가할 것) Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave. 10X PB..

PCR-Uracil 을 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 [내부링크]

Site-directed mutagenesis Site-directed mutagenesis는 특정 DNA 염기서열을 변화시켜, 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있는 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야이다. DNA 재결합시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용하기도 함. promoter나 enhancer 연구에서 어떤 transacting factor가 결합하여 기능을 하는지를 알기 위하여 그 결합 부위의 염기서열을 변화 시켜서 결합을 못하게 한 다음 promoter나 enhancer의 활성을 측정함으로써 그 transacting factor의 중요성을 타진할 수도 ..

PCR-4primers 를 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 [내부링크]

Cell cycle analysis [FACS - PI staining] 실험 방법 정리 [내부링크]

@ Cell cycle analysis 란? (자세한 설명은 생략) - 세포내 DNA 를 PI 로 염색하여 FACS로 분석하는 방법 I. preparation of PI staining - Wahing buffer : 2% FBS in PBS (or 2% BSA in PBS) / PBS 만 사용 가능 - 1.12% sodium citrate buffer (pH 8.5) - RNase A (50ug/ml in 1.12% sodium citrate buffer pH 8.5) - PI solution (BD Pharmingen Cat. #550825) * PI solution 조성 (만들어 사용 가능) PI 50 ug/ml (stock sol. 5 mg/ml) Sodium citrate 0.1 % (stock..

[중드-정주행] 판타지 로맨틱 중국드라마 "차시천하 (且试天下), Let's try the world" 강력 추천 [내부링크]

차시천하 (且试天下), Let's try the world - 중국 텐센트 비디오 제작 : 경령월의 소설 '차시천하'가 원작 - 방영 : WeTV, NetFlix,Watcha,TVing 등... - 한국 공식 홈페이지 (2021년 제작, 2022년 방영, 40부작) - 내용 요약 (스포 있어요~ ^^) : 대동제국(황제의 나라) 와 여섯 제후국 (옹주, 청주, 기주, 유주, 상주, 북주) 으로 나뉜 시대를 배경으로 하고 있다. 대동이 6주를 다스리는 기반(?)을 두고 있는 '현극령' 이 사라져서 그것을 수색하라고 황제가 6주에 명을 내리고, 이에 천하를 차지하기 위해 6주의 왕들이 현극령을 찾아나서는 사건들이 일어나는 이야기로부터 시작된다. 또한, 옹주 둘째왕자 풍란식 (천하 통일을 꿈꾸는 은천수사의 주..

[중드-정주행] 판타지 로맨스 중국 드라마 "유리미인살 (琉璃), Love and Redemption" 강력 추천합니다. [내부링크]

유리미인살 (琉璃), Love and Redemption - 중국 youku 제작 - 방영 : CnTV, NetFlix, TVing 등... - 한국 공식 홈페이지 (2020 제작, 59부작) - 내용 요약 : 삼계 (천계, 요마계, 인간계) 를 배경으로 하고 있다. 수라왕 (요마계) 은 요족과 마족 연합군을 결성해 천계를 공격하는데, 특히 요마계의 마살성 나후계도가 뛰어난 능력으로 천군을 제압하고 천계는 위기에 처하게 됩니다. 천계에서의 마지막 전투에서 갑자기 마살성 나후계도가 사라지게되고, 천계에는 전신장군이라는 새로운 영웅이 나타나 요마 연합군을 제압하게 됩니다. 마살성나후계도의 혼을 유리잔에 봉인한 후 아주 깊은 산속에 봉인하고, 시간은 흘러 천년 이후부터 스토리는 시작됩니다. 요마족은 마살성 나..

PCR-Dpn I 을 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 [내부링크]

Site-directed mutagenesis Site-directed mutagenesis는 특정 DNA 염기서열을 변화시킴을 의미하는, 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야이다. 즉 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있다. 또 DNA 재결합시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용되기도 한다. 또한 promoter나 enhancer 연구에서 어떤 transacting factor가 결합하여 기능을 하는지를 알기 위하여 그 결합 부위의 염기서열을 변화 시켜서 결합을 못하게 한 다음 promoter나 enhancer의 활성을 측정함으로써 그 transacting facto..

RT-PCR (Revers Transcription PCR) 실험 방법 정리 [내부링크]

RT-PCR (Revers Transcription PCR) 이란? 생물학적 샘플 (세균, 세포, 조직, 바이러스 등) 에서 특정 RNA 분자를 검출하고 정량화하는 데 널리 사용되는 실험실 기법입니다. RNA 분자가 역전사라는 과정(역전사 효소를 사용하여)을 통해 상보적 DNA(cDNA)로 합성되고결과물인 cDNA는 원본 RNA 분자의 안정적인 사본 역할을 하며 검출을 위해 쉽게 증폭할 수 있습니다. 다음과 같은실험에 응용할 수 있습니다. 1. 특정 단백질의 RNA 수준 (mRNA; transcription) 에서의 발현량 확인 2. 특정 단백질을 암호화하고 있는 gene 또는 mRNA 의 분리 3. 특정 시료를 처리한 후 특정 단백질의 mRNA 수준에서의 발현량 비교 등 원리는 옆 그림을 참조하세요. ..

RNA 정량 (RNA 농도 측정) 방법 및 요약 정리 [내부링크]

DNA, RNA 정량 방법 (UV-Vis spectrophotometer 사용) 분리 정제된 DNA 또는 RNA 를 정량할 수 있는 방법으로 UV 파장대 (260/280nm) 의 흡광도를 측정하여 제시된 계산식에 의해 농도(ug/ or ng/)을 산출할 수 있다. 분리 정제된 DNA, RNA 는 실험실 수준의 UV-Vis spectrophotometer 또는 nano-drop 장비로 측정이 가능하지만, ssDNA, ssRNA, oligomer 등은 산출은 가능하지만, 정확한 계산 또는 측정의 오차가 있으므로 해당 장비보다 정밀하고 고가의 장비를 사용하는 것을 추천한다. 참고로, RT kits 로 합성된 cDNA 의 농도는 측정 할 수 없으므로 합성 전 사용된 total RNA 의 양을 기준으로 실험을..

RNA purification (RNA 정제) 어렵지 않아요~! 실험 진행 시 주의 사항 핵심 정리 요약입니다. [내부링크]

RNA (Ribonucleic acid) 란? 특징 및 구성은 아래와 같다. - 전형적인 포유동물세포는 세포당 약 10-5 μg의 RNA를 함유하고 있다. - ribosomal RNA (주로 28S, 18S, 5S) 80∼85% - 여러 종류의 소분자 RNA(transfer RNA, small nuclear RNA 등) 10∼15% - mRNA는 세포내 전체 RNA중 1∼5% 정도로 크기(수백개에서 수천개 염기)와 염기배열 순서가 다양하며, 거의 모든 포유동물의 mRNA에는 3'쪽 끝에 poly(A) tail이 있어 oligo(dT) cellulose를 이용한 affinity chromatography로 순수 분리할 수 있다. RNase의 작용 최소화 - RNase 는 온도, pH 등의 극한 환경에서도 ..

누구나 할 수 있는 동물 세포 배양 방법 (Cell culture) 정리 - 처음부터 끝까지 요약! [내부링크]

동물세포 (animal cell) 배양(culture ) 방법 : 동물 세포 배양은 다양한 과학 및 생명공학 분야에서 여전히 중요한 도구로 사용되고 있으며, 해당 분야의 기술과 지식이 발전함에 따라 그 응용 분야가 지속적으로 확대되고 있습니다. 동물 세포 배양에 대한 몇 가지 일반적인 사항은 다음과 같습니다. 세포주: 동물 세포주는 배양에서 지속적으로 증식할 수 있도록 불멸화 또는 변형된 세포입니다. 배지 및 배양 조건: 동물 세포는 성장을 위해 영양분이 풍부한 특정 배지와 적절한 온도, pH, 습도 등 환경 조건이 필요합니다. 무균 상태: 동물 세포 배양에서는 세포의 생존력과 무결성에 영향을 줄 수 있는 박테리아, 곰팡이 또는 기타 미생물에 의한 오염을 방지하기 위해 무균 상태를 유지하는 것이 중요합니..

COVID-19 국내 백신 개발 기업 및 현황 (2022년 기준) [내부링크]

윤석열 정부 들어 "백신주권 가와의 중요성"을 강조하며 문재인 정부와 차별성을 두고 정책적으로 추진하고 있음. 제4차 비상경제민생회의에서 발표한 ‘바이오헬스 산업 혁신방안’에 따르면 "코로나19 백신임상 시험 중인 국내 기업들에 대한 지원 및 5000억 원 규모의 감염병 대응 메가펀드를 조성" 하기로 하였음. - 2022년 현재 국내 코비드19 (Covid-19) 백신 개발 현황은 (표) 와 같음. - 사용허가는 유일하게 "SK바이오사이언스-스카이코비원" 으로 재조합 단백질 플랫폼 기반 백신임. - 하지만 대표적인 변이인 오미크론에 의해 국내외 재유행으로 기존의 개발된 코비드19 백신의 유효성이 떨어질 것으로 예상됨. 따라서, 이에대한 대응 전략을 마련하고 있으며(표 참조), 세부적인 내용은 아래에 기술..

COVID-19란? (PART II. 초기 개발 백신) [내부링크]

- PART I. 에서 언급했듯이 급성 호흡기 질환을 유발하는 SARS/MERS-CoV 바이러스는 Coronaviridae 에 속하는 RNA 바이러스로 각각 SARS (SARS-CoV), MERS (MERS-CoV), COVID-19 (SARS-CoV-2) (이상 중증 폐렴 유발) 보고되었으며, 팬데믹 COVID-19 의 백신 개발은 SARS (SARS-CoV), MERS (MERS-CoV) 대상으로 개발중인 백신 플랫폼 (mRNA, viral vector, recombinant protein) 이 사용되어 신속하게 백신으로 개발할 수 있었음. 1. SARS (Severe acute respiratory syndrome, 중증급성 호흡기 증후군) - 현재까지 백신 개발 및 연구 현황은 SARS 치료제나 ..

COVID-19 란 ? (Part I. SARS/MERS/Covid-19) [내부링크]

급성 호흡기 질환을 유발하는 SARS/MERS-CoV 바이러스는 Coronaviridae 에 속하는 RNA 바이러스로 분류되며, 사람에게 감염력이 있다고 알려진 바이러스는 총 7종으로 229E, OC43, NL63, HKU1 (이상 감기 유발), SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2 (이상 중증 폐렴 유발) 보고됨. 1. SARS (Severe acute respiratory syndrome, 중증급성 호흡기 증후군) - 중증 폐렴 질환을 유발하는 Coronaviridae 에 속하는 RNA 바이러스로써, SARS-CoV로 명명된 바이러스에 의해 2002년 11월에서 2003년 7월까지 26개국에서 약 8,096명의 환자가 발생하였으며 치사율(774명)은 약 9.6% 임(국가지정 의과학연..

내피세포(Endothelial Cell) 배양이 어렵나요? 참고해 보세요 ^^ "내피세포 배양 방법 핵심 정리" [내부링크]

내피세포 (Endothelial Cell) 란? - 혈관 및 림프관의 내벽을 덮고 있는 단층의 편평세포로 세포질이 적고, 혈관의 장축 방향으로 긴 타원형의 핵을 갖고 있다. 내피세포의 내강면은 평활하며, 세포의 외측면(線)에서 서로 견고하게 결합하고 있어 인접하는 세포는 서로 겹치는 부분을 볼 수가 있다. Endothelial Cell line 의 종류 - 혈관으로부터 분리되어 세포주로 사용되고 있다. ; Large vessel (Aorta 대동맥, Artery 동맥, Vein 정맥) / Small vessel (Capillary 모세혈관) - 사람의 분리된 혈관 조직에 따른 세포주의 이름 및 약어 목록은 다음과 같으며, 혈관 세포주 또는 정상 세포주를 사용해야 하는 실험은 대부분 13. HuVEC 세포..

월드컵 한국 경기 일정 - (2022 카타르 월드컵) [내부링크]

개요 - 22번째 월드컵(FIFA) 으로 아시아에서 역대 두번째로 개최하는 월드컵이다. 아시아에서 첫번째로 개최한 "2002년 한일 월드컵" 에 이어 역대 두 번째로 개최하는 월드컵이며, 역사상 최초로 중동 (아랍) 지역에서 개최하는 대회이며, 마지막 32개국 본선 체제 대회이다. - 카타르 날씨는 여름철 낮 평균 기온은 무려 40~50C에 육박하며, 여름에는 운동 경기는 물론이고 외출조차 쉽지 않기때문에 사상 최초로 중동지역의 겨울에 해당하는 11~12월에 개막하는 월드컵이다. 대한민국 경기 일정 대한민국 선수단 (감독 : 파울루 벤투, - 골키퍼 3, 수비수 9, 미드필더 12, 공격수 2)

COVID-19 란? (PART III. 개요) [내부링크]

중증급성호흡기증후군 - 중국의 원인 미상의 폐렴 집단 발병(우한시)의 원인 병원체 (바이러스) ; 신종 코로나바이러스의 명칭이 정확히 규정되기 전에는 ‘신종코로나’, ‘우한 폐렴’ 등으로 불림 ; 원인 병원체가 코로나바이러스(coronavirus)로 확인 → WHO는 우한 폐렴의 원인 병원체 ‘novel coronavirus(2019-nCoV)’로 임시 명명 2월 12일 ‘coronavirus disease 2019(COVID-19)’로 공식적으로 명명함. - 국내는 한글 공식 명칭으로 '코로나바이러스감염증-19'(국문 약칭 ‘코로나19’)로 명명(‘20. 2. 12.) - ‘CO’는 코로나(corona) ‘VI’는 바이러스(virus) ‘D’는 질환(disease), ‘19’는 신종 코로나바이러스로..

광역학(역동)(photodynamic therapy: PDT) 치료란? [내부링크]

광역학치료(photodynamic therapy: PDT)는 레이저와 광감각제(또는 광민감제: photosensitizer)에 의해 apoptosis, necrosis, vascular shutdown, local immune 작용을 일으켜 cytotoxic effect를 유도하는 치료법으로 1900년에 Rabb이 아크리딘 용액속의 짚신벌레에 노출시킨 짚신벌레(paramecia) 에서 광독성이 확인 된 이래 꾸준히 발전해 왔다. 연구배경 1960년 Lipson 등이 광감각제로 헤마토포르피린 (hematoporphyrin)을 사용하여 수술 중 종양부위에서 형광을 확인함으로써 임상적으로 종양의 진단에 대한 가능성을 제시하였고 이후 1976년 Kelly 와 Snell 등이 방광암 환자의 치료에 광역학치료를 이..

고혈당이 유발하는 혈관내피세포 고사 기전 연구 (박사과정중) [내부링크]

고혈당(Hyperglycmia)으로 인한 당뇨병 혈관합병증의 원인에 Human vascular endothelial cells(HuVEC)에서의 세포고사(apoptosis) 기전을 Bcl-2 family(bax-alpha, bcl-XL) 를 중심으로 어떤 기전으로 관여하는지를 연구하고자 하였음. 실험결과 RT-PCR 결과 HuVEC 에서 D-glucose 에 의한 bax-alpha 의 발현량은 1.2~1.6 배 증가하였다. 반면, D-mannitol 에 의한 발현량은 변화가 없음이 확인되었다. 또한, bax-alpha 의 발현량이 증가할수록 bcl-XL 의 발현량은 감소하였다. D-glucose 5mM 에서는 exposure 시간이 지속될수록 bax-alpha 가 증가하였으며, D-glucose 30mM..

한탄바이러스 감염의 선천면역 반응 (박사 요약) [내부링크]

본 논문에서는 한탄바이러스에 감염된 혈관내피세포에서 감염된 세포의 제거에 관여하는 아포토시스, 바이러스 증식 억제에 관여하는 인터페론 관련인자들, 그리고 면역세포에 바이러스 항원제시에 관여하는 TAP 유전자 및 MHC class I의 변화를 관찰하여 한탄바이러스에 대한 특유의 방어기전을 연구하였다. 실험방법 및 결과 한탄바이러스에 감염된 혈관내피세포를 1일, 3일, 5일, 7일째까지 배양하여 세포 생존율, PI staining, Bcl-2 Family 중 Bax/Bcl-xL 유전자의 RT-PCR을 이용한 mRNA 발현양과 western blot을 이용한 단백질의 변화를 관찰하여 아포토시스 기전을 조사하였다. 또한 바이러스 증식의 억제 물질인 IFN-α/β의 mRNA 발현양, IRF-3/7와 MxA 유전자..

세파계 항생제 생산을 위한 인공 효소 개발 (석사 요약) [내부링크]

세파계 항생제는 Acremonium crysogenium 의 발효산물인 cephalos-porin C(CPC)를 정제하여 화학적 방법이나 효소 처리 방법으로 7번 위치의 aminoadipyl 기를 제거한 7-aminocephalosporanic acid(7-ACA)를 만든 다음(deacylation), 이 7-ACA를 기본물질로 하여 반합성 항생제를 제조하고 있다. 효소에 의한 CPC 생변환 방식은 수용액상에서 반응이 진행되기 때문에 CPC 의 분리 정제 공정이 필요 없고, 또 유해한 화공약품을 사용하지 않으므로 폐수 처리를 위한 특수 시설이 불필요하여 7-ACA 생산 단가를 낮출 수 있는 장점이 있다. 연구의 목적 및 방법 본 연구의 목적은 D-amino acid oxidase(DAAO) 효소를 이용한..

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