Mini-prep (plasmid DNA prep), 전기영동 기본 원리 실험


Mini-prep (plasmid DNA prep), 전기영동 기본 원리 실험

1.배경 mini-prep 재조합 plasmid를 형질전환하여 LB-Amp배지에서 16시간 culture한후 mini-prep으로 다량의 plasmid DNA를 얻는다. Plasmid DNA는 plasmid을 지니고 있는 bacteria에서 적은 양의 배양으로 분리될수 있다. Bacteria는 sodium dodecyle sulfate(SDS), NaOH를 함유하는 용액으로 처리하여 용균되어 진다(여기서 SDS는 bacterial proteins을 변성시키며 NaOH는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 변성시킨다). 다음 potassium acetate를 첨가하여 혼합액을 중성화시키는데 이것은 covalently closed plasmid DNA를 빠르게 reanneal 시킨다. chromosomal DNA와 bacterial proteins의 대부분은 침전되며(SDS는 potassium과 화합물을..........



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