[분자생물학 실험] Western Blot / PVDF membrane / NC membrane

1. 원리 Western blotting은 특정 단백질을 탐지하고 정량화하는 데 사용됩니다. 이 기법은 SDS-PAGE를 통해 단백질을 분리한 후, 이를 membrane으로 전사(transfer)하고 특정 항체를 사용하여 단백질을 탐지하는 과정을 포함합니다. 출처 : 위키피디아 2. 단계별 절차 1) 샘플 준비: 단백질 샘플을 준비하고, SDS-PAGE를 위해 적절한 농도로 조정합니다. 2) SDS-PAGE: 단백질을 크기에 따라 분리합니다. 이 과정에서 단백질은 음전하를 띠고 전기장에서 이동하게 됩니다. 3) 전사(Transfer): SDS-PAGE 젤에서 단백질을 membrane(보통 PVDF 또는 니트로셀룰로오스)으로 옮깁니다. 이 과정은 전기 블로팅이라고도 합니다. 비특이적 결합을 방지하기 위해 membrane을 차단제(예: 탈지유)로 처리합니다. 4) 항체 처리: 특정 단백질을 탐지하기 위해 1차 항체를 처리하고, 이어서 2차 항체를 처리합니다. 2차 항체는 효소나 형광 물...

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