Plasmid DNA Transfection Efficiency 에 영향을 미치는 요인 [내부링크]

성공적인 transient transfection은 plasmid DNA를 시작으로 여러가지 요인에 영향을 받습니다. 높은 transfection efficiency(형질주입 효율) 을 보장하기 위해서는 사용하는 플라스미드 DNA가 transfection grade여야만 합니다. 그런데 transfection grade가 실제로 무엇을 의미할까요? Transfection grade는 플라스미드 자체의 몇 가지 특성, 예를 들어 구조의 토폴로지(topology), 플라스미드 DNA의 품질, 그리고 엔도톡신 레벨을 가리킵니다. 이 글에서는 플라스미드 prep을 성공적으로 만드는 요소를 잘 이해하는데 도움이 되도록 각 특성에 대한 요구사항에 대해 설명하도록 하겠습니다. 토폴로지 (topology) 토폴로지 (topology, 위상학)는 DNA의 기하학적 및 공간적 특성, 특히 선형(linear), 이완된 원형(relaxed circular)또는 초나선형(supercoiled) 여부를 나타

[Biotage] Flash Chromatography [내부링크]

새로운 물질이 합성되면 내가 원하는 타겟 물질만이 합성되는 것이 아니라 여러 부산물이 포함된 혼합물로 만들어 집니다. 여기에는 Starting materials 뿐만 아니라 촉매, 반응 부산물, 용매 그리고 타겟물질이 포함되어 있으므로 다음 단계의 합성을 위해서는 충분한 순도로 타겟물질을 분리해 내야 합니다. 지금까지는 레진으로 채워진 유리 컬럼 상단에 실험자가 직접 용매를 첨가하여 크로마토그래피 상호작용을 통해 점진적으로 물질을 분리해왔습니다. 바이오타지(Biotage)는 복잡하게 합성된 시료를 정제할 수 있는 자동화 된 Flash Chromatography 장비를 공급합니다. 자동화 된 기기와 함께 Pre-packing된 Flash Column을 사용하여 합성된 물질의 표적 분자를 신속하게 그리고 빠르게(Flash) 분리합니다. 이와 같이 바이오타지는 속도 뿐만 아니라 회수율의 최대화에 중점을 두고 있습니다. 바이오타지의 Flash Chromatography는 매우 빠르고 재현성

Selekt 메뉴얼 [내부링크]

Selekt 사용자 메뉴얼입니다. 소프트웨어 사용법 위주로 구성되어 있습니다. 첨부파일 Selekt 메뉴얼(최신).pdf 파일 다운로드

컬럼 부피(Column Volume, CV)의 정의, 결정 방법 [내부링크]

Flash 크로마토그래피에서 컬럼 부피(Column Volume, CV)는 정확하게 무엇이고 어떻게 결정될까요? 컬럼 부피(일반적으로 CV로 표현)는 Flash 크로마토그래피에서 일반적인 용어로 분리능(Separation Quality)과 주입 용량(loading capacity)를 결정하는데 활용이 됩니다. 자주 사용되는 용어이지만, 정확한 의미와 어떻게 CV가 결정되는지 모르시는 분들이 많습니다. 일부 연구원들은 충진재가 없는 빈 컬럼 자체의 부피를 CV로 혼동하는 경우가 있지만, CV는 빈 컬럼 내부 부피를 의미하지 않습니다. 정확하게 CV는 충진재가 채워져 있는 컬럼의 총 부피를 말합니다. 이 부피는 충진재가 차지하는 공간과 공극(충진재 사이의 비어진 공간)과 충진재 내부 다공성 부피(Pore Volume) 공간 모두를 포함합니다. 참고로 컬럼 내부의 충진재는 육안으로는 매끈해보이지만, 대부분 다공성의 구멍으로 비워져 있습니다. 이렇게 비워져 있는 공간들을 모두 합하면, 충진

세계 유일의 Maxi, Mega, Giga Scale의 Automated Plasmid DNA Purification 장비 [내부링크]

Biotage PhyPrep system Automated Plasmid Purification system Transient transfection과 클로닝에 필수적인 플라스미드(plasmid) 정제. 코로나로 인해 유전자치료제 시장과 바이오시밀러 시장이 커지는 만큼 플라스미드 정제 스케일도 커지고 있습니다. 다행히 대부분의 키트들이 사용하기 쉽고 매운 간단하게 나와 있습니다. 즉, 숙련된 기술이 없더라도 프로토콜에 따라 누구나 쉽게 플라스미드 정제를 할 수 있습니다. 오히려 너무 지루하고 반복적인 과정으로 인해 스텝을 빼먹는 실수를 할 확률이 더 높습니다. 그렇지만 Maxi, Mega, Giga 스케일의 경우 수동으로 직접 정제하는 방법 밖에 없었습니다. Maxi, Mega, Giga 스케일의 플라스미드(plasmid) DNA를 자동으로 정제하는 세계 최초& 유일한 자동화 시스템Biotage PhyPrep을 소개합니다. 이제 플라스미드(plasmid) DNA 정제는 자동화시스템에

단백질 정제를 위한 새로운 크로마토그래피- Dual Flow Chromatography [내부링크]

Dual Flow Chromatography(DFC, 이하 DFC로 표기)는 모든 PhyTip에 적용되는 특허받은 기술로 약 17년 이상 자동 샘플 정제에 사용되어 왔습니다. 일반적인 크로마토그래피는 한 쪽 방향으로 진행되는 반면 DFC는 양쪽 방향으로 진행되는 특징을 가지고 있습니다. 바이오타지의 PhyTip 컬럼은 이 DFC 기술을 이용하여 자동으로 샘플을 정제할 수 있도록 설계되었습니다. DFC는 표준 liquid handling systems에서 자동 샘플 정제를 위한 독특한 유형의 크로마토그래피입니다. PhyTip 컬럼과 DFC를 사용한 단백질 및 플라스미드 정제는 다음과 같은 장점을 제공합니다. 쉬운 자동화 - 메이저 liquid handling system들에 사용 가능한 PhyTip 컬럼을 제공하므로 사용자의 실험실에 가지고 있는 장비와 연결하여 사용할 수 있으며 자동화 장비 셋팅에 필요한 프로토콜도 지원 가능합니다. 부드러운 정제 - DFC 기술은 바이오분자들의 네이

[Biotage] 항체 IgG 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

ProPlus PhyTip - Automated Purification of IgG antibodies ProPlus와 ProPlus LX PhyTip 컬럼들은 IgG 항체의 정제를 위해 사용할 수 있습니다. ProPlus(MabSelect Sure, Cytiva) 와 ProPlus LX (MabSelect SuRe LX, Cytiva) 는 Protein A 친화성 결합물질(리간드)의 엔지니어링된 버전의 친화성 미디어로 Protein A와 Protein G 두 가지의 속성을 모두 가지고 있습니다. MabSelect Sure는 저농도의 샘플로부터 IgG의 다량의 결합을 위해 IgG의 oriented binding(IgG에 대한 ligand 사용)을 이용하여 mouse IG에 대한 선택성을 높였습니다. 경우에 따라서 MabSelect Sure가 Protein G보다 3~5배 높은 회수율을 보여줍니다. MabSelect SuRe is a licensed trademark of Cytiva

파이펫팁에서 단백질을 정제하는 새로운 기술 - Dual Flow Chromatography- [내부링크]

Dual flow chromatography(DFC, 이하 DFC)는 최소한으로 흡수가 일어나도록 특허받은 mesh를 가지고 있는 파이펫 팁(PhyTip) 끝에 패킹된 컬럼 베드에서 크로마토그래피 분리를 수행할 수 있는 프로세스입니다. DFC 기술은 Hamilton STAR 또는 Tecan Freedom Evo와 같은 일반적인 liquid handling 로봇에서 스몰 스케일 단백질 정제와 같이 매우 수동적인 프로세스를 자동화할 목적으로 2004년 Douglas Gjerde에 의해 개발되었습니다. 오늘날 DFC는 자동화된 플라스미드 정제 또는 기타 화합물 형태에도 사용할 수 있습니다. 어떻게 작동할까요? PhyTip 컬럼을 샘플에 넣은 후 샘플을 팁 내부의 패킹된 레진 베드를 가로질러 앞뒤로 움직이게 합니다(파이펫팅, 아래 동영상 참고). 크기가 큰 biomolecules의 느린 이동 속도에도 불구하고 샘플 혼합물이 레진 베드를 가로질러 일정한 플로우로 한 번 이상 앞뒤로 반복됨에

어떤 경우에 Isocratic 보다 Gradient 추출이 좋을까요? [내부링크]

Isocratic? Gradient? 이 둘의 차이는 무엇일까요? 어떤 경우에 사용하게 되는 것일까요? 이 두 가지 방법은 혼합물질을 분리하는Chromatography 이론에 있어서 반드시 알아야 하는 기본적인 내용에 해당되지만, 실제 Flash Chromatography 장비 사용 유저들 조차 정확하게 설명을 못하는 경우가 많습니다. 이번 기회에 정리해보면 좋을 것 같습니다. Isocratic, Gradient 추출? Flash Chromatography 추출과정을 정리해보면, 이동상 물질(Mobile Phase, Flash에서는 용매가 되겠죠)에 시료를 녹여 정지상 물질(Stationary Phase, 컬럼이 됩니다.)을 통과시키면서 추출이 진행됩니다. 이 과정에서 혼합되어 있는 물질마다 다르게 나타나는 통과되는 속도의 차이, 다른 말로 머무름 시간의 차이를 통해 혼합 물질을 분리하여 원하는 물질을 추출 또는 정제하게 되죠. 따라서 적절한 머무름 시간에 차이를 만들어 주여야만 원

쎈돌이로 옮기지 말고, 단백질 침전을 쉽게 해보자! [내부링크]

ISOLUTE PPT+ Protein Precipitation Plates Manual PPT vs. ISOLUTE PPT+ 비교 Vortex Mixing Centrifuging Automation Manual PPT(Protein Crash) O O X ISOLUTE PPT+ X X O 일반적인 수동 단백질 침전법(이하, 수동 PPT) 수동 PPT 과정 예시, 출처 DOI: 10.1101/2021.09.24.461247 단백질 침전 플레이트(ISOLUTE PPT+)는 수동 PPT(수동 단백질 크래쉬)보다 더 깨끗한 샘플로 전처리 할 수 있으며 96웰 형식의 자동화를 가능하게 합니다. 불순물과 수동 볼텍스, 그리고 원심분리 및 상등액 전달과정을 제거할 수 있습니다. Plasma 구성 요소 특히 대용량 및 높은 처리 수 검사의 경우, 수동 PPT에 비해 더 효율적인 작업 흐름과 더 깨끗한 샘플을 얻을 수 있습니다. ISOLUTE PPT+ ISOLUT PPT+는 크래쉬 단백질을 트랩하도

Plasmid prep 할때 buffer의 역할 [내부링크]

Alkaline lysis 방법으로 plasmid prep을 수행할 때 각 buffer의 역할 Resuspension Buffer (Tris-HCl, EDTA) : Tris-Cl은 완충작용을 하고 EDTA는 세포벽을 군데군데 깨주는 역할을 합니다. 참고로 EDTA는 세포벽의 integrity를 유지하는데 필수적인 calcium ion을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 하며 2가 양이온을 필요로 하는 DNase 등의 효소 활성을 없애 주는 역할도 합니다. 이 때 glucose나 sucrose가 첨가되어 삼투압을 유지시켜 세포의 형태를 유지하도록 할 수도 있습니다. 때로는 lysozyme(peptidolycan 제거)를 쓰기도 합니다. Lysis Buffer (SDS, NaOH) ; SDS는 ionic detergent로 세포막을 파괴시키는데 그렇게 되면 세포안에 있던 chromosomal DNA와 플라스미드 DNA는 밖으로 나옵니다. 이 때 NaOH, 즉 알칼리 용액에 노출된 DN

[Biotage] His-tagged 단백질 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

IMAC PhyTip - Automated Purification of Histidine Tagged Proteins Histidine tag은 재조합 단백질의 정제를 위해 가장 흔하게 사용되는 tag 입니다. 일반적으로 His-tags은 6개 또는 그 이상의 histidine amnio acids로 이루어져 있습니다. Immobilized metal affinity chromatography (IMAC) 분리 레진은 his-tagged proteins의 정제를 위해 사용할 수 있으며 Elution은 imidazole (100 - 250mM)이 포함된 버퍼를 이용합니다. PhyTip은 Dual flow chromatography라 불리는 기술을 이용하여 back-and-forth cycles를 반복하여 샘플을 정제합니다. Dual flow Chromatography 기술을 이용한 단백질 정제과정 동영상 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백

[Biotage]Custom Packing Service of the Resin [내부링크]

Custom Packing of the Resin of Your Choice in a PhyTip Column Format 바이오타지는 다른 단백질 종류의 정제를 위한 다양한 범위의 레진이 패킹되어 있는 PhyTip 컬럼을 제공합니다. 만약 찾고 있는 제품이 없을 경우 custome packing service를 이용할 수도 있습니다. PhyTip 컬럼 패킹의 숙련되고 기술과 경험을 이용하여 어떤 친화성 미디어, 실리카 또는 입자크기가 40 µm이상인 레진이든 PhyTip 컬럼 형태로 패킹할 수 있습니다. 또한 컬럼은 많은 메이저 자동화 시스템과 호환가능하도록 만들 수 있습니다. 레진은 바이오타지에서 레진 공급사로부터 직접 구매하거나 고객이 직접 제공할 수 있습니다. 패킹 후 남은 레진은 사용자에게 되돌려 보내주거나 차후 발주를 위해 6개월까지 보관할 수 있습니다. 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백질 정제에 사용되어져 왔습니다. Phy

[Biotage] GST-tagged 단백질 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

Glutathione PhyTip - Automated Purification of GST-tagged Proteins Glutathione PhyTip columns 은 GST-tagged antibody 및 다른 재조합 단백질들의 정제를 위해 사용할 수 있습니다. GST-tag(glutathione S-transferase)는 26kDa의 작은 단백질로 발현된 재조합 단백질의 용해도를 향상시키는 것으로 알려져 있습니다. 당사의 버퍼키트에는 정제 프로토콜에 필요한 모든 버퍼가 포함되어 있습니다. Glutathione PhyTip 컬럼을 올바르게 사용하려면 0.06mL/min의 느린 유속이 필요합니다. 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백질 정제에 사용되어져 왔습니다. PhyTip은back-and-forth cycles를 반복하여 샘플을 정제하는 기술로 Dual Flow chromatography 라고 불리는 process로 각 정제 단계

과불화화합물(PFAS) 국내 공정시험법 정리 및 비교 [내부링크]

과불화화합물(PFAS) 국내 공정시험법 내용을 알기 쉽게 정리하였습니다. 1. 과불화화합물 시험법 대상 화합물 비교 - 대상 화합물 개수/종류 및 시료 종류 정리 2. 과불화화합물 국내 시험 방법 - 구체적인 시험 방법 정리 과불화화합물 공정시험법 파일 첨부파일 ES 10363.1a 하천수, 호소수 시료 중 과불화화합물(PFAS) 시험기준-LC MSMS.pdf 파일 다운로드 첨부파일 ES 10390.1 폐수 시료 중 과불화합물(PFCs) 시험기준-LC, MSMS.pdf 파일 다운로드 첨부파일 ES 04506.1 과불화화합물-액체크로마토그래피-텐덤질량분석법.pdf 파일 다운로드 첨부파일 먹는물 수질감시항목 과불화화합물발췌_환경부.pdf 파일 다운로드 1. 과불화화합물 시험법 대상 화합물 비교 No. 국립환경과학원 환경부 ES 10363.1a ES 10390.1 ES 04506.1 하천수/호소수(27종) 폐수(14종) 하천수,폐수(14종) 먹는물(3종) 1 PFHxA PFHxA PFHx

PhyTip에서 정제할 수 있는 최대 샘플 볼륨은? [내부링크]

한번에 12개 이상의 단백질을 정제할 수 있는 PhyTip 에 관한 정보는 아래에서 확인할 수 있습니다. https://blog.naver.com/biotage_sales/222804537082 [Biotage] 항체 IgG 정제를 위한 컬럼 ProPlus PhyTip - Automated Purification of IgG antibodies ProPlus와 ProPlus LX PhyT... blog.naver.com

Dry loading을 위한 DLV 사용법 [내부링크]

Dry Loading을 위한 DLV 사용방법입니다. 합성 펩타이드나 small molecules를 정제할 수 있는 바이오타지 MPLC 장비 "SELEKT" 에 관해서는 아래 링크에서 확인할 수 있습니다. https://blog.naver.com/biotage_sales/222851717187 [Biotage] MPLC Selekt System Features Two Column Channel Normal phase, Reverse phase의 두 가지 상으로 Purification을 진행... blog.naver.com

MiniPrep(Silica membrane) vs. MaxiPrep( Anion exchange chromatography)은 단순히 수율 차이일까요? [내부링크]

Anion exchange column Miniprep과 Maxiprep의 차이가 단순히 수율의 차이일까요? miniprep은 대부분 silica resin을 이용하며 Maxi Prep 이상은 anion exchange resin을 사용합니다. Resin의 차이에 따른 plasmid DNA purity 차이에 관한 좋은 글이 있어서 소개드립니다. Plasmid Procedure Plasmid DNA 정제는 박테리아 세포의 alkaline lysis 부터 시작합니다. 이후의 정제 단계는 RNA와 DNA를 거의 구별하지 못하기 때문에 Lysis 과정에서 RNA는 RNase를 이용하여 제거합니다. 세번째 단계에서 세포 단백질과 genome DNA는 원심분리를 통해 침전시켜서 제거합니다. 상등액은 플라스미드 DNA를 포함하며, silica membrane 또는 음이온 교환(anion-exchange) 크로마토그래피를 통해 정제하는데 이 때 어떻게 정제하느냐에 따라 plasmid DNA의 순

[Biotage]Dalton Mass Detectors [내부링크]

Isolera Dalton 2000 https://blog.naver.com/biotage_sales/222851717187 [Biotage] MPLC Selekt System Features Two Column Channel Normal phase, Reverse phase의 두 가지 상으로 Purification을 진행... blog.naver.com 흔히 우리들이 알고 있는 MPLC의 Detecting system은 위의 게시물에서 말씀 드린 것 처럼, UV 흡광(200~400nm)을 기본으로, 가시광선 영역(400-800nm)을 옵션으로 제공합니다. 이 외에 저희 바이오타지에서는 파장대 외에 ELSD 그리고 물질의 분자량을 검출하는 Isolera Dalton을 제공합니다. 오늘 소개해 드릴 장비는 Isolera Dalton 입니다. 기존의 MPLC가 흡광되는 파장대를 측정하여 물질을 분류하는 것이었다면 Isolera Dalton은 물질의 분자량을 측정하여 물질을 분류합니다.

Dry Loading VS Liquid Loading 어느 것이 Flash크로마토그래피에 더 좋은가요? [내부링크]

합성 화합물 또는 천연물 정제 시, 여러분은 어떤 방식으로 시료를 주입(loading)할 지 선택해야 합니다. 간단하게 두 가지 방법으로 나눠지는데 용매에 녹아있는 시료를 그대로 주입하는 Liquid Loading 방법, 그리고 시료를 흡착시킨 후, 용매를 날린 후에 주입하는 Dry Loading 방법이 있습니다. Dry Loading 방법이 건조 과정 등 시간이 더 들어가겠죠. 하지만, 어느 것을 선택하는 지에 따라 결과에 영향을 줄 수 있습니다. 두 방법 중, 당연하게도 Liquid Loading 이 더 간편하고 빠르지만, 물질의 순도(Purity)를 높이기 위해서는 아래 내용에 대하여 생각해볼 필요가 있습니다. 시료의 양(Volume)을 줄이고, 농도 최대화 주입된 시료의 양이 많을 경우, Column 내에서 동일한 부피를 차지하게 됩니다. 이는 분리된 band(혹은 peak)들을 늘어지게 하여(broader elution bands) 분리능 감소 및 분획된 물질의 순도를 낮추

[Biotage] Liquid Handling System을 이용해 동시에 96개의 플라스미드 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

MiniPrep PhyTip Columns - Automated Plasmid Purification in MiniPrep Scale 바이오타지사의 MiniPrep PhyTip 컬럼은 Liquid Handling Sytem을 이용하여 1mL의 culture pellet에서 샘플당 최대 15μg의 플라스미드 DNA를 일관된 수율로 얻을 수 있는 High throughput plasmid miniprep DNA 정제 솔루션입니다. 고순도의 플라스미드 DNA는 transfection, transformation, sequencing, PCR 및 cloning에 적합합니다. 당사의 MiniPrep PhyTip 컬럼은 Beckman, Tecan 및 Hamilton 시스템에서 사용할 수 있습니다. 이점 Cell Pellets 부터 플라스미드 DNA 정제까지 완전자동화 - MiniPrep PhyTip 컬럼은 편리한 전자동 워크플로로 플라스미드 DNA를 정제합니다. 1. 원심분리 후 상층액이 제거

항체 정제를 위한 affinity resin 선택은? [내부링크]

아래 링크를 통해 항체 정제를 위한 PhyTip에 관한 더 많은 정보를 확인할 수 있습니다. https://www.biotage.com/antibody-purification Antibody purification application page Antibody purification by a variety of affinity chromatography medias by PhyTip columns. www.biotage.com

Sample Preparation 웨비나 모음 [내부링크]

안타깝게 놓쳤던 바이오타지 Sample preparation에 관한 웨비나를 언제든지 시청할 수 있습니다. https://sampleprep.biotage.com/webinars Featured Webinars Sign Up to View our On Demand Webinars sampleprep.biotage.com 카카오톡 채널에 "바이오타지코리아"를 친구추가하시면 웨비나소식과 함께 바이오타지에 관한다양한 소식을 알려드립니다. http://pf.kakao.com/_puxgxhs 바이오타지코리아 안녕하세요. 바이오타지코리아 카카오톡 공식 채널 입니다. pf.kakao.com

Organic & Peptide 웨비나 모음 [내부링크]

안타깝게 놓쳤던 바이오타지 Organic & Peptide 웨비나를 언제든지 시청할 수 있습니다. 카카오톡 채널에 "바이오타지코리아"를 친구추가하시면 웨비나소식을 비롯한 바이오타지에 관한 다양한 소식을 알려드립니다. http://pf.kakao.com/_puxgxhs 바이오타지코리아 안녕하세요. 바이오타지코리아 카카오톡 공식 채널 입니다. pf.kakao.com

[웨비나]임상시료로부터 샘플 준비방법 [내부링크]

[웨비나]석유계탄화수소(EPH) 의 분획 자동화 [내부링크]

식품공전 전처리 방법 - 아세설팜칼륨, 사카린나트륨 및 아스파탐 동시분석법 [내부링크]

출처: 식품공전, 3.2.2 아세설팜칼륨(acesulfame K), 사카린나트륨 및 아스파탐 동시분석법 왼쪽부터 아세설팜칼륨, 사카린나트륨, 아스파탐 화합물 구조 분석원리 식품 중의 아세설팜칼륨(acesulfame K), 사카린나트륨 및 아스파탐을 물로 추출 후 여과하거나 여과액을 #아세설팜칼륨 ( #acesulfame K)과 #사카린나트륨 은역상계 및 강 #음이온 교환형 카트리지, #아스파탐 은 강 #양이온 교환형 카트리지로 각각 정제한 다음 액체크로마토그래프로 정성 및 정량분석하는 방법이다. 시험용액 조제는 검체성상에 따라 4가지로써, 액상, 고체/반고체, 단백질 또는 지방함량이 높은 검체로 분류되어 각각 다르게 조제하도록 되어 있다. 식품공전 원문 참고, 3.2.2 아세설팜칼륨(acesulfame K), 사카린나트륨 및 아스파탐 동시분석법 https://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=10031 해당 카트리지 제품 역상 P

Drug discovery를 위한 MiniPrep 자동화 [내부링크]

최근 몇년 동안 큰 분자의 약물발견 과정에서 처리량이 훨씬 더 많아짐에 따라 많은 사람들이 샘플 관리를 자동화하는 방법을 찾고 있습니다. Genetech(세계최초의 생명공학 벤처, 재조합DNA 기술을 개발한 보이어가 창립) 의 Karen Billeci와 동료가 작성한 논문에는 한 달에 24,000개의 플라스미드 샘플을 정제하는 MiniPrep의 자동화 프로세스가 실험실에 어떻게 셋팅되었는지 설명되어 있습니다. 이들의 목표는 이전에 사용된 semi-automated 방법과 같거나 더 높은 품질의 정제된 플라스미드 DNA를 생성하는 High-throughput 플라스미드 MiniPrep에 대한 자동화 프로세스를 얻는 것이었습니다. Transformation 먼저, Hamilton Microlab STAR를 이용하여 플라스미드 DNA와 컴피턴트 세포를 섞어줍니다. 인큐베이션 후 Hudson RapidPick Complete 시스템으로 자동 콜로니 피킹을 수행하고 콜로니를 deep-well

[웨비나] 분석샘플준비_Rethinking Routine analytical Workflows through volume reduction and.... [내부링크]

일반적인 분석 워크플로우에서 벗어나 샘플 볼륨을 줄이고, 적은 양의 용매를 소비하는 방법에 대해 고민해 보신적 있나요? 기존의 방법에서 벗어나 높은 분석 감도를 제공하는 최신 SPE 기술, MIKRO SPE를 Biotage 웨비나를 통해서 확인해보세요. 일시 (한국표준시) : 1. 2022년 11월 29일(화) 오전 12시 ~ 오후 1시 2. 2022년 11월 29일(화) 오후 7시 ~ 오후 8시 등록 : https://hubs.ly/Q01sGcVW0 (무료) 웨비나 주요 내용 - 미세 용출(Micro-elution)과 기존 SPE의 고유한 차이점 - MIKRO SPE의 애플리케이션 이점 - 분석물 복구 개선을 위한 문제 해결 방법 - 기존 SPE 워크플로우와 MIKRO SPE 자동화 워크플로우의 성능을 직접 비교 - 남용 약물, 스테로이드, 카테콜아민 및 메타네프린의 전처리에 대한 논의 Webinar Host: 첨부파일 웨비나_MIKRO.pdf 파일 다운로드

PhyTip을 이용하여 96개의 샘플들을 정제하는데 걸리는 시간은? [내부링크]

아래 링크를 통해 PhyTip Column에 관한 더 많은 정보를 확인할 수 있습니다. https://www.biotage.com/biomolecule-purification Biomolecule purification application page Biomolecule purification by PhyTip columns: antibody purification, purification of tagged proteins, mass spectrometry sample preparation, ion exchange etc. www.biotage.com

충분한 양의 단백질을 회수하는 방법 [내부링크]

아래 링크를 통해 PhyTip에 관한 더 많은 정보를 확인할 수 있습니다. https://www.biotage.com/biomolecule-purification Biomolecule purification application page Biomolecule purification by PhyTip columns: antibody purification, purification of tagged proteins, mass spectrometry sample preparation, ion exchange etc. www.biotage.com

[웨비나 파일]Oligonucleotide Therapeutics : Chemistry and therapeutic modalities [내부링크]

11월 3일에 진행되었던 올리고뉴클레오타이드에 관한 웨비나를 아래 링크를 통해 다시 보실 수 있습니다. Oligonucleotide Therapeutics : Chemistry and therapeutics modalities Webinar presented by Prof Tom Brown Snr. (Oxford University) Biotage Webinar : https://www.biotage.com/oligo_webinar1_lp Webinar: Advancements in Oligonucleotide Therapeutics Biotage Webinar: Advancements in Oligonucleotide Therapeutics www.biotage.com 제품에 관련된 내용은 아래 링크를 통해 확인할 수 있습니다. https://www.biotage.com/oligonucleotide-synthesis Oligonucleotide synthesis Oligonucle

Biomolecules 웨비나 모음 [내부링크]

안타깝게 놓쳤던 바이오타지 바이오 웨비나를 언제든지 시청할 수 있습니다. https://biomolecules.biotage.com/biomolecules-on-demand-webinars On-Demand Webinars Watch our Biomolecule purification on-demand webinars at your leisure. biomolecules.biotage.com 카카오톡 채널에 "바이오타지코리아"를 친구추가하시면 웨비나소식과 함께 바이오타지에 관한 다양한 소식을을 알려드립니다. http://pf.kakao.com/_puxgxhs 바이오타지코리아 안녕하세요. 바이오타지코리아 카카오톡 공식 채널 입니다. pf.kakao.com

Transient transfection을 위해 효율적으로 plasmid DNA를 얻는 방법 [내부링크]

아래 링크를 통해 더 많은 정보를 확인할 수 있습니다. https://hubs.ly/Q01lYnZ-0 Biomolecule purification application page Biomolecule purification by PhyTip columns: antibody purification, purification of tagged proteins, mass spectrometry sample preparation, ion exchange etc. hubs.ly

[웨비나]Oligonucleotide Therapeutics : Chemistry and therapeutic modalities [내부링크]

유전자 발현을 조절하는 핵산 기반 치료제는 지난 수십 년 동안 꾸준하게 임상 사용을 위해 개발되어 오다가 최근 몇 년 동안 특히 가속화되어 발전되었습니다. 이번 웨비나는 옥스포드대학의 Tom Brown 교수가 최근 올리고뉴클레오타이드 치료제의 발전에 관해 설명하는 첫번째 교육 웨비나입니다. Key Learning Objectives: • Appreciating the different modes of action of therapeutic oligonucleotides • Understanding current limitations of the field • Understanding the nature of the modifications that are needed to produce biologically active oligonucleotides 일시 : 2022년 11월 3일 오전 11시 등록 : https://hubs.ly/Q01p_zQy0 Oligonucleotide Th

[학회부스]제17회 한국유전자세포치료학회 정기학술대회 부스 참여 [내부링크]

이미지 출처 : 한국유전자세포치료학회 웹페이지 안녕하세요. #바이오타지코리아(주)입니다. 제17회 한국유전자세포치료학회 정기학술대회에 참여하여 Automation Plasmid Pufirication System인 #PhyPrep (Maxi, Mega and Giga Scale)을 전시합니다. 부스방문객을 대상으로 간단한 설문조사와 함께 스타벅스 커피쿠폰 증정 이벤트를 진행할 예정이니 많은 관심 부탁드립니다. 감사합니다. 일시 : 2022년 11월 3일(목)~4일(금) 장소 : 세종대학교 대양AI센터 12층 컨퍼런스룸 학회 정보 : http://www.ksgct.org/index.php?hCode=CONF_SYMPO_LIST ::한국유전자세포치료학회:: Korean Society of Gene and Cell Therapy 학술행사 국내외 행사일정 학회정기학술행사 기타행사 행사포토갤러리 정기학술대회 다시보기 학회정기학술행사 > 학술행사 > 학회정기학술행사 제17회 한국유전자세포치료학

[학회부스]제53회 한국생약학회 정기총회 및 학술대회 부스참여 [내부링크]

이미지출처: 한국생약학회 웹페이지 안녕하세요. #바이오타지코리아(주)입니다. 제53회 한국생약학회 정기총회 및 학술대회에 MPLC 장비에 Select를 전시할 예정입니다. 일시 : 2022년 11월 3일(목)~4일(금) 장소 : 이화여자대학교 ECC 학회 링크 : https://www.ksp.or.kr/ 학술대회는 2일간 진행되지만 부스 전시는 11월 3일(목) 하루만 진행합니다. 일정 참고 부탁드리며 많은 관심 부탁드립니다. 감사합니다.

[Biotage]Microwave Synthesis [내부링크]

바이오타지의 합성 장비, Microwave를 소개합니다. 전통적인 Organic synthesis을 실험하는 실험실에서는 Heating block을 사용하여 가열된 블럭을 통해 Vial 안에 열을 전달하는 방법으로 마그네틱바를 사용하여 교반을 하면서 합성을 진행해 왔습니다. 합성량이 많을 경우 더 큰 Heating block과 Beaker를 사용하면 되니 편리하다는 장점이 존재합니다. 그러나 타겟 합성물이 생성되기 까지 시간이 많이 소요되며 온도 제어의 어려움으로 불균일 반응을 초래할 수 있으며 이로 인해 많은 양의 부산물 생성 되는 단점이 존재합니다. 전통적인 방법으로 Organic 합성 시 단점 소요되는 시간 일관적이지 않는 결과물(원하는 타겟 물질보다 많은 부산물 생성의 가능성) 오염물질 유입 가능성(재사용) 저희 바이오타지의 Microwave Initiator+ 는 이러한 전통적인 가열법의 단점을 제거한 Microwave를 이용한 유기합성 장비입니다. Microwave 우리가

[웨비나]Breaking Bottlenecks Simplifying Your Peptide Purification [내부링크]

[바이오타지 웨비나] 펩타이드 합성 후 RP-HPLC를 사용한 정제는 펩타이드 합성 워크플로우에서 가장 시간이 많이 소요되는 부분 중에 하나입니다. Flash Chromatography를 이용하여 전체 비용을 최소화하면서 시간 개선 및 용매 소비를 감소하는 방법을 웨비나를 통해 확인할 수 있습니다. Key Learning Objectives: • Advantages of HPFC when compared to Prep HPLC and its viability as a technique for purification of peptide • Strategies to implement this in your lab using analytical HPLC data • Examples of difficult purifications 일시 : 2022년 11월 15일 오전 11시 등록(무료) : https://hubs.ly/Q01qS1pl0 Biotage Webinar: Breaking Bot

[Biotage]용매 증발을 위한 V-10 Touch Evaporation System [내부링크]

V-10 Evaporation System 유기합성이나 천연물 관련 종사자 분들의 가장 큰 고충 중에 하나가 바로 사용하는 용매의 증발 입니다. 샘플을 농축시키기 위해 회전증발농축기, 동결건조, 질소 농축기 등이 일반적으로 사용되지만 시간이 오래걸리고 깔끔하게 날아가지 않는다는 단점이 있습니다. Biotage V-10은 이러한 단점을 제거하는 것 뿐만 아니라 NMP와 DMF와 같은 용매도 증발시킬 수 있어 합성 스텝에서 다양한 용매의 사용을 가능하게 합니다. 펩타이드 합성을 진행할 경우에는 cleavage cocktail을 제거하거나 HPLC fractions를 농축시키기 위해서도 사용할 수 있습니다. 대표적인 용매의 농축 시간입니다. Evaporation Performance V-10 에서 Evaporation 가능한 용매입니다. What Can It do? How Does it Do it 다양한 용매에 따른 Default 되어 있는 method를 불러오는 방식은 고객들이 장비를

[Biotage]Selekt 장비의 사용법(1) [내부링크]

오늘은 앞서 소개해 드린 Selekt 장비의 사용법을 동영상을 통해 확인해 보도록 하겠습니다. Column 거치법 Selekt에 Column을 거치하는 방법 Column을 line에 연결할 시에 주의하셔야 할 점은 아래부터 연결을 하시고 그 다음 윗부분을 연결하는 것 입니다. 아랫부분의 line이 장비에 고정되어 있기 때문에 line을 회전시키면 같이 풀릴 위험이 있습니다. 2. Flush & Purge 버튼의 사용법 최근 역상 Column에 대한 사용이 늘어남에 따라 사용법에 관한 문의가 많아지고 있습니다. 다른 분석장비의 C18 Colum 사용법과 동일하게 Biotage C18 Column도 Pre-Equilibration 과정이 필요하며 이 과정을 Activation이라 명명하고 있습니다. 아래의 동영상을 통해 Column 사용 전에 line 설정, 용매의 주입량, 유속, 컬럼 종류 등을 선택하는 방법에 대해 알아보겠습니다. 새로운 C18 Cartridge를 받게 되면 Acti

과불화화합물(PFAS), 먹는물 EPA 시험법 533 [내부링크]

Application Note : Manual Extraction of PFAS in Drinking Water in Compliance with EPA Method 533 (EPA 시험법 533에 따른 음용수 내 PFAS 수동 추출) EVOLUTE PFAS 533 SPE 과불화 및 폴리불화 알킬 물질( #PFAS )은 20세기에 시작된 이래로 많이 사용되어 왔으며, 환경 시험 내에서 면밀하게 모니터링되는 화합물 중 하나가 된다. 이 Application Note에는 EPA Method 533을 따르려는 사용자를 위한 절차가 요약되어 있다. 제시된 데이터는 EVOLUTE PFAS 533 SPE 및 TurboVap LV 시스템과 함께 PFAS 대용량 추출(LVE) 키트가 있는 BiotageVacMaster 진공 매니폴드를 사용하여 생성되었다. Biotage Application note 원본 다운로드 링크 https://selekt.biotage.com/hubfs/ANALYTICAL/

[Biotage] 다양한 종의 IgG를 정제하기 위한 컬럼 [내부링크]

CaptureSelect IgG-Fc (ms) PhyTip - Purification of IgG in Various Species by Binding to the Fc Region CaptureSelect IgG-Fc(ms)는 IgG 항체의 Fc 부위에 결합함으로써 다양한 종의 IgG들을 분리하는데 사용할 수 있습니다. 즉, 생쥐(mouse), 소, 토끼, 쥐(rat), 염소, 말, 사람 그리고 양을 포함하는 다양한 종으로부터 IgG를 분리하기 위해 사용할 수 있습니다. (ms - Multispecies) CaptureSelect IgG-Fc(ms)는 헤비체인의 Fc 부위에 결합합니다. 스탠다는 용출 조건에서 낮은 수율, 해리된 동종이량체 및 변성된 항체를 초래하는 문제를 나타내는 것으로 알려진 Protein G와 달리 이 제품은 gentle elution 조건에서 정제를 하여도 단백질의 구조적 및 기능적 온전함을 유지할 수 있습니다. ThermoFisher의 CaputreSele

[Biotage]Selekt 장비의 사용법(2) [내부링크]

저번 시간에는 Selekt 장비의 기본 사용법에 대한 동영상을 보았습니다 (아래 링크 참고). https://blog.naver.com/biotage_sales/222882554661 [Biotage]Selekt 장비의 사용법(1) 오늘은 앞서 소개해 드린 Selekt 장비의 사용법을 동영상을 통해 확인해 보도록 하겠습니다. Column 거치... blog.naver.com 1.Column 거치법, 2. Flush & Purge의 사용법, 3. Dry Load Vessel(DLV) 즉 고체상 Loading법에 이어 오늘은 SELECT 장비에 대한 응용방법에 대한 동영상입니다. 4. Liquid loading 법 고체상 Loading법보다는 조금 쉬운 액체상 Loading법에 대한 동영상 입니다. 액체상 로딩시 용매간섭이 생길 수 있으므로 추천드리지만, 액체로 분리결과가 좋을 경우 굳이 고체상을 할 필요는 없습니다. 액체상 Loading법에서 주의해야 할 것은 Cartridge가 커질

[Webinar] Accelerating high throughput antibody purification using dual flow chromatography [내부링크]

Drug discovery와 development process에서 high throughput antibody purification은 매우 중요해졌습니다. 바이오마커 발견, high-throughput screening 또는 스케일 다운 공정 개발 등을 위해 자동화된 small-scale 정제는 더 많은 연구를 가능하게 하고, 워크플로우를 단축하고 표준화된 결과를 얻을 수 있도록 합니다. 2022년 10월 19일 PhyTip 컬럼을 사용하여 플라스미드 정제와 항체 정제 모두에서 drug discovery와 development를 가속화 할 수 있는 방법을 확인할 수 있습니다. 일시 : 2022년 10월 19일 오전 11시 등록 : https://hubs.ly/Q01n1Yxq0 Biotage Webinar: Accelerating high throughput antibody purification using dual flow chromatography Register for our

[Biotage]Mass Spectrometry 사용전에 사용가능한 역상 컬럼 [내부링크]

Reversed Phase PhyTip Columns - Sample Desalting for Mass Spectrometry Analysis Reversed phase PhyTip 컬럼은 질량 분석 분석 전에 단백질 및 펩타이드 샘플의 자동화된 탈염 또는 정제에 사용됩니다. mass spectrometry에서 사용가능한 용매에서도 High capacity와 recovery를 가지고 있으므로 Reversed phase PhyTip 컬럼은 질량 분석 전에 샘플 준비 워크플로를 개발하는 데 최적의 선택입니다.Reversed phase PhyTip 컬럼은 다양한 크기의 단백질 및 폴리펩타이드와 결합할 수 있습니다. Absolute binding capacity는 더 작거나 더 극성인 폴리펩타이드에서 더 높습니다. 종류 1. PhyTip Columns Packed with C4 (300 Å) Reversed Phase Silica 2. PhyTip Columns Packed with C18

[Biotage] 항체 IgG를 정제하기 위한 Protein A 컬럼 [내부링크]

Protein A PhyTip Columns - Automated Purification of IgG Antibodies Protein A는 항체 정제를 위해 가장 많이 사용되는 affinity media입니다. Protein A와 Protein G는 IgG 항체의 Fc 위치에 결합하고 IgG의 아형에 다양한 선택성을 가지고 있습니다. 그 결과 Protein A와 Protein G PhyTip columns은 IgG 항체들이나 Fc 위치를 포함하고 있는 IgG fragment의 정제를 위해 사용할 수 있습니다. 바이오타지의 Protein A PhyTip columns은 높은 친화력과 수용력을 가지고 있기 때문에 다양한 레벨의 백그라운드 단백질로부터 높은 순도의 functional IgG 항체들을 정제할 수 있습니다. 바이오타지의 Protein A PhyTip columns은 모든 자동화 처리시스템으로 전송할 수 있는 Dual flow chromatography protocol을 함께

[Biotage] Human kappa light chain을 가지고 있는 IgA, IgM, IgD 그리고 IgE 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

CaptureSelect KappaXL PhyTip Columns - Purification of IgA, IgM, IgD, IgE and their Fab and F(ab')2 fragments by binding to the kappa light chain. CaptureSelect KappaXL affinity media가 패킹되어 있는 PhyTip column은 모든 human kappa light chains와 결합하여 human 항체들을 정제하기 위해 사용할 수 있습니다. 이 affinity media는 특별히 human Kappa light chain을 가지고 있는 모든 항체들 (IgA, IgD, IgE 그리고 IgM 포함)과 Kappa Fab, Kappa F(ab')2 을 가지고 있는 fragment를 정제하기 위해 특별히 디자인되었습니다. ThermoFisher의 CaputreSelect의 affinity ligands는 약 14kDa의 재조합항체조각으로 항체 또는

[Biotage]이온교환크로마토그래피 컬럼 [내부링크]

Ion Exchange PhyTip Columns 이온 교환 크로마토그래피는 고순도의 최종 생성물을 얻기 위한 orthogonal chemistry으로서 친화성 크로마토그래피 정제 후 별도의 정제 단계 또는 두 번째 연마 정제 단계에 사용할 수 있습니다. 목적하는 단백질의 반대 전하를 가진 레진에 결합시켜 분리, 정제하는 것입니다. 단백질은 등전점 (총 전하가 0이 되는 pH, pI)보다 높은 pH에서 (-)를 띠게 되며 낮은 pH에서 (+)를 띠게 됩니다. 참고로 이온교화체의 이름은 분리하고자 하는 단백질의 표면전하입니다. 예를 들어 내가 분리하고자 하는 단백질이 (+) 를 띠고 있을 경우 Cation(양이온) Exchange를 사용해야하며 실제 교환체는 (-)전하를 가지고 있습니다. 교환체에 결합한 단백질의 염농도를 서서히 높이면 결합이 약한 단백질부터 차례대로 용출됩니다. Ion Exchange PhyTip 컬럼은 적은 단백질 샘플을 High-Throughput을 자동화시스템

[Biotage]Sfär Column(Cartridge) [내부링크]

바이오타지의 정품 컬럼에 대해 소개해 드리겠습니다. Biotage Sfär Column 바이오타지는 약 30년이상 카트리지를 생산해 왔습니다. 그렇게 쌓인 노하우가 쌓여 현재 sfär 컬럼 으로 이어지는 3세대 컬럼을 공급하고 있습니다. 바이오타지의 카트리지는 타사 카트리지와는 다른 몇 가지 특징을 가지고 있습니다. 이름에서 부터 나타나는 sfär 컬럼 입니다. 혹시 바이오타지의 본사가 어디에 위치해 있는지 아시나요? 바로 북유럽의 중심인 스웨덴 입니다. sfär 는 스웨덴어로 '구형' 이라는 의미를 지니고 있습니다. 이름에서 부터 알 수 있듯이 내부의 충진제(Silica, C18)가 '구형'으로 구성되어 있습니다. Biotage Sfär HC Biotage SNAP Silica Type Spherical Irregular Loading Volume Silica Size 50-60um(평균, 분포도가 좁음) 40-60um(평균, 분포도가 넓음) Surface Area 700m2/g

Plasmid DNA의 quality를 체크하는 방법(흡광도 비율, 전기영동, 엔도톡신 레벨) [내부링크]

Transfection 효율은 플라스미드의 품질에 크게 영향을 받습니다. 여기에서 플라스미드의 품질을 확인하기 위해 샘플의 흡광도 비율을 측정하는 방법, 아가로스 겔을 성공적으로 읽는 방법, 낮은 엔도톡신 값의 중요성에 대해 설명하도록 하겠습니다. 흡광도 비율 측정 플라스미드 정제 후 첫 번째 단계는 항상 NanoDrop 또는 흡광도 측정 장비를 사용하여 수율을 측정하는 것입니다. NanoDrop은 DNA가 흡수되는 파장인 260nm에서 흡광도를 평가하여 농도를 측정합니다. 그리고 A 260 /A 280 및 A 260 /A 230 비율을 측정하여 오염 물질과 비교하여 샘플에 얼마나 많은 DNA가 있는지 확인할 수 있습니다. A 260 /A 280 비율은 DNA 순도를 측정하는 데 사용됩니다. 값이 1.8 이상일 경우 "pure"로 받아 들여집니다. 비율이 낮으면(<1.6) 샘플에 단백질이 포함되어 있다는 것을 의미합니다. 왜냐면 단백질은 280nm에서 흡광을 가지기 때문입니다. 이

Supercoiled plasmid를 얻는 방법? [내부링크]

법의학 시료 전처리에 최적화된 EVOLUTE SPE [내부링크]

1. 소변에서의 불법 약물 검출 ( #LC-MS/MS ) Hydrolysis Efficiency Using EVOLUTE HYDRO CX 30 mg Plate UPLC-MS/MS 분석 전에 EVOLUTE HYDRO CX 96-well 플레이트를 이용하여 소변에서 96개 불법 #남용 #약물을 추출합니다. #EVOLUTE HYDRO CX 플레이트는 Well 내에서 가수분해를 수행하는 효율적인 방법을 제공합니다. 이 방법은 높은 분석물질 회수, 시료 이송 단계 제거에 따른 추출 시간 단축, 컬럼 조절 및 평형화 단계 제거에 따른 시료 이월오염 또는 교차 오염 위험 감소 등을 제공합니다. 2. 혈액에서의 펜타닐 검출 Fentanyl 전혈 검체로부터 #펜타닐 화합물을 추출하는 데 사용할 수 있는 몇 가지 기술이 있습니다. 패널에 있는 화합물, 원하는 추출물 순도, 화합물 복구 및 추출 시간을 고려하여 애플리케이션에 가장 적합한 방법을 결정하는 것이 중요합니다. ISOLUTE #SLE + 를

[Biotage] Desalting & Buffer Exchange Column [내부링크]

Gel Filtration PhyTip Columns - Automated High Throughput Desalting and Buffer Exchange Size exclusion chromatography resin이 패킹되어 있는 Gel filtration PhyTip 컬럼은 단백질 샘플의 염 제거와 버퍼 교환을 위해 사용할 수 있습니다. Affinity PhyTip 컬럼을 이용한 단백질 정제 후 2차 정제를 위해 사용할 수 있습니다. (예 : IMAC 친화성 정제 후 imidazole 제거). 다른 PhyTip 컬럼과 마찬가지로 레진은 컬럼 바닥에 레진 베드를 유지하는 두 개의 불활성 스크린 사이에 채워집니다. 그러나 다른 PhyTip 컬럼과 달리 겔 여과 컬럼은 샘플을 탑에 로딩하여 중력으로 겔을 통해 샘플을 흘립니다. 겔 여과 PhyTip 컬럼은 5K 및 30K size exclusion resin을 사용할 수 있으며 각각 5kDa와 30kDa 이상의 분자량을 가진 샘플

[Biotage] AAV 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

AAVX PhyTip - Automated Affinity Purification of Adeno-Associate Viruses Adeno-associated virus (AAV)는 DNA를 원하는 곳으로 전달할 수 있는 외피 비보유 바이러스 (non-enveloped virus)로 약 4.7kb 단일가닥의 유전체로 구성되어 있으며 핵막이 없습니다. AAV는 근육이나 혈관내피세포 그리고 신경세표를 포함한 다양한 세포의 세포질과 핵으로 다양한 종류의 cargo를 전달하기 위한 벡터로 사용할 수 있습니다. 바이러스 생산의 downstream workflow에서 일반적으로 친화성 크로마토그래피 정제를 이용하여 플라스미드 DNA와 숙주세포의 RNA/DNA와 같은 불순물을 제거하고 그 다음에 anion exchange를 이용해 empty capsids를 제거합니다. CaptureSelectTM AAVX affinity matrix는 유전자치료응용분양에 사용되는 넓은 번위의 자연발생 및 합성

[Biotage] MPLC Selekt System [내부링크]

Biotage Selekt System : High Performance automated Flash System Features Two Column Channel Normal phase, Reverse phase의 두 가지 상으로 Purification을 진행해야 할 때가 있습니다. Biotage의 Selekt는 하나의 장비로 두 가지 컬럼 사용이 가능합니다. 두 가지 채널을 사용하여 Normal phase, Reverse phase의 정제를 진행해 보세요! 물론 각 상에 맞는 컬럼을 사용해 주셔야 한다는 것 잊지 마세요! Flow rates of 300mL/min and 30 Bar Biotage는 Lab scale로는 5g~1.85kg까지 다양한 컬럼을 제공하고 있습니다. 이렇게 커다란 컬럼을 사용하는 만큼 그에 맞는 유속, 그리고 장비 자체가 견디는 압력이 필요합니다. Biotage의 Selekt는 최대 300mL/min, 30bar로써 실험 단계에서 쓰이는 컬럼에 필요한

Direct and Indirect Immunoprecipitation이란? [내부링크]

Immunoprecipitation(면역침강법, IP)는 단백질 분리를 위해 사용되는 가장 잘 알려진 방법으로 단백질의 물리화학적 특성, 번역 후 변화 또는 다양한 조직이나 세포주에서 발현 정도등을 연구에 유용한 방법입니다. Immunoprecipitation(면역침강법)은 원하는 특이적인 단백질과 이 단백질과 결합할 수 있는 항체 그리고 항체의 Fc 부분에 특이적으로 결합하는 Protein G나 Protein A 등이 부착되어 있는 affinity media를 이용합니다. 즉 cell lysate, serum 또는 biological fluids로부터 특이적인 단백질은 bridging antibody의 antigen binding site와 결합하고 이 항체의 Fc chain은 Protein A 또는 Protein G affinity resin과 결합합니다. 이 후 원심분리로 affinity resin을 아래로 침전시키고 상등액을 제거하여 분리함으로써 항체-단백질 복합체를 분리,

[Biotage] 항체 IgM 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

POROS CaptureSelect IgM PhyTip - Purification of IgMs by Binding to the Fc Region POROS CaptureSelect IgM affinity matrix는 IgM 항체의 Fc 위치에 결합하여 IgM 항체를 정제하기 위해 사용할 수 있습니다. 이 affinity media는 NHS-activated Sepharose 4 Fast Flow resin (Cytiva)에 결합된 CaptureSelect affinity ligand로 구성되어 있습니다. IgM의 Fc 위치에 있는 특이한 도메인과 결합함으로써 이 affinity media는 혈장, 혈청 그리고 세포 배양 상층액과 같은 복합 물질로부터 human 과 mouse의 IgG와IgA 교차반응없이 human과 mouse IgM만을 특이적으로 정제할 수 있습니다. ThermoFisher의 CaputreSelect affinity ligands는 약 14kDa의 재조합 항체 조

[Biotage] human IgG subclass (I, II, III and IV) 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

CaptureSelect Fc-XL PhyTip- Purification of Human IgG Subclesses by Binding to the CH3 Domain CaptureSelect FcXL affinity media가 패킹되어 있는 PhyTip column은 모든 human IgG subclass (I, II, III and IV)의 CH3 domain에 결합하여 재조합 human IgG, Fc fusion proteins 그리고 혈장에서 얻어진 IgG를 정제하기 위해 사용할 수 있습니다. ThermoFisher의 CaputreSelect affinity ligands는 약 14kDa의 재조합항체조각으로 항체 또는 항체조각(fragment)의 어떤 부분과 선택적 결합을 할 수 있습니다. 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백질 정제에 사용되어져 왔습니다. PhyTip은 back-and-forth cycles를 반복하여 샘플을 정

LC-MS/MS 분석을 위한 불순물 제거 방법 [내부링크]

SLE(Supported Liquid Extraction) 지지형 액체 추출 일반적으로 널리 사용되는 #액-액 #추출 방식(#LLE)은 서로 섞이지 않는 액체를 이용하여 목표 물질이 용존되어 있는 액체를 분리하여 추출하는 방식으로써, 액상이 완전히 나뉘는 시간이 오래 걸리고 층간에 생성된 에멀전에 의해 결과의 재현성에 영향을 줍니다. 하지만 지지형 액체 추출 방식(#SLE)은 목표 물질이 섞여있는 매트릭스를 가공된 규조토로 이루어진 카트리지에 물리적 흡착을 시킨 후, 분석하고자 하는 물질만 유기용매로 추출하므로, 기존의 LLE에 비해 빠른 시간 내에 더 많은 샘플을 높은 재현성으로 추출할 수 있습니다. Extrahera(엑스트라헤라) - Filtration, SLE, SPE 자동화 시스템 Biotage Extrahera SPE 전처리 자동화 Extrahera는 미리 저장된 메소드를 이용해 Filtration, SLE, SPE를 반복적으로 수행하는 자동화 장비입니다. Extrahera

[환경 시료 전처리] 수분제거, 추출, 농축 솔루션 [내부링크]

1. DryVap 농축 시스템 DryVap을 사용하면 오토샘플러 바이알(Autosampler Vial)에 연결하여 농축 가능합니다. DryVap 농축 시스템과 농축 바이알 * 농축 자동 종료 옵션 (Endpoint Volume) - 2ml GC/LC Vial (0.9ml) - 1ml Tip (1.0/ 0.9/ 0.8ml) - 0.5ml Tip (0.5/ 0.4/ 0.3ml) DryVap 농축 시스템 DryVap 농축 시스템은 GC 및 GC/MS 분석 전처리 장비로써, 유기용매 추출물을 건조 및 농축합니다. 기존의 Kuderna Danish(KD) 방식을 모방하도록 설계된 DryVap 농축 시스템은 진공, 열 및 질소 가스 스파징의 고유한 조합을 사용합니다. 고유 조합에 의해 추출물을 신속하게 증발시키고 원하는 부피까지 농축하는 동시에 목적 화합물질을 안전하게 회수할 수 있습니다. DryDisk-R을 연동하여 사용할 수 있으므로, 수분제거와 물질 농축을 한 번에 진행할 수 있습니다.

[Biotage] Biotin-tagged 단백질 정제를 위한 컬럼 [내부링크]

Streptavidin PhyTip - Automated Purification of Biotin Tagged Proteins Streptavidin과 biotin의 결합은 자연에서 가장 강한 비공유결합으로 biochemistry 연구에 흔하게 사용합니다. Streptavidin PhyTip 컬럼은 immobilized streptavidin affinity ligand로 패킹되어 있어 재조합 biotin-tagged 단백질의 정제를 위해 사용할 수 있으며모든 자동화 시스템에 적용할 수 있는 프로토콜을 함께 제공합니다. 또한 Streptavidin PhyTip 컬럼은 면역 침강(Imunoprecipitation)이나 pull down assay를 위해 사용할 수도 있습니다. (아래 첨부 자료 참고) 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백질 정제에 사용되어져 왔습니다. PhyTip은back-and-forth cycles를 반복하여 샘플을 정제

[Biotage] 항체 정제를 위한 protein G 컬럼 [내부링크]

Protein G PhyTip - Automated Purification of IgG Antibodies Protein A와 Protein G는 IgG의 IgG 항체의 Fc 위치에 결합합니다. 바이오타지의 Protein A와 Protein G PhyTip columns은 Fc region을 가지고 있는 IgG fragment의 정제를 위해 사용할 수 있습니다. 특히 Protein G 는 아형과 종에따른 높은 특이성 때문에 human IgG3와 rat IgG2a와 같은 일부 경우에 Protein A보다 더 선호됩니다. 바이오타지의 Protein G PhyTip columns은 높은 친화력과 수용력을 가지고 있기 때문에 다양한 레벨의 백그라운드 단백질로부터 높은 순도의 functional IgG 항체들을 정제할 수 있습니다. 이점 PhyTip column은 2002년에 개발되어서 현재까지 많은 자동화 단백질 정제에 사용되어져 왔습니다. PhyTip은 back-and-forth cycl

질량분석 전처리는 바이오타지 SPE !! [내부링크]

1. Biotage Mikro SPE micro(µ)의 스웨덴어인 Mikro로 명명된 Mikro SPE 플레이트는 아래 디자인 이미지처럼, 적은 양의 EVOLUTE 충진제가 독특한 디자인의 팁에 충진되어 매우 적은 양의 용출액으로도 뛰어난 회수율을 기대할 수 있는 제품입니다. 2. Mikro SPE Plate 디자인 일반적인 SPE는 lower frit(하부 프릿)과 SPE 팁 하단 끝 사이에 빈공간(#dead_volume)이 존재합니다. Micro-elution 플레이트는 일반적인 SPE 카트리지에 비해 적은 양의 용출액을 사용하기 때문에, dead volume의 영향으로 회수율이 부족하거나, 로딩 및 워싱 단계에서 flow-path 발생, 점도가 높은 시료의 걸림 현상 등이 발생할 수 있는 단점이 있습니다. 바이오타지에서 새롭게 출시된 Mikro SPE 플레이트에 적용된 PhyTip 디자인은 lower-mesh가 팁끝에 장착된 형태로 충진제와 팁 사이의 데드 볼륨이 없으며, me